伯樂bio-rad轉(zhuǎn)印槽的優(yōu)點和使用前后的注意事項

　　1小時內(nèi)轉(zhuǎn)印2塊10x7.5cm凝膠；也可以進行低強度的隔夜轉(zhuǎn)印。

　　電極絲相距4cm以產(chǎn)生強電場保證高效的蛋白轉(zhuǎn)印。

　　彩色標記的轉(zhuǎn)印夾和電極確保轉(zhuǎn)印過程中凝膠的正確定向。

　　藍色致冷芯可*置于bio-rad轉(zhuǎn)印槽內(nèi)，在快速轉(zhuǎn)印過程中吸收熱量。

　　既可作為完整的獨立設備，也可作為一個模塊與緩沖液槽和蓋兼容。

 

　　伯樂bio-rad轉(zhuǎn)印槽使用前后的注意事項：

　　1、轉(zhuǎn)印前準備：在電泳結(jié)束前30分鐘應開始準備工作在電泳過程中，提前準備轉(zhuǎn)印所需物品：根據(jù)轉(zhuǎn)印所用膠的大小，剪一稍比膠大一些的厚濾紙和一剛好大小的厚濾紙，將此兩張膜浸入電轉(zhuǎn)印液中；再剪四張大小為5cm×2cm的PVDF膜，左下角剪去一角，將此膜浸泡在甲醇溶液中不超過1min后取出浸入ddH2O中1min，取出浸入轉(zhuǎn)印液中（切濾紙和膜時一定要戴手套，因為手上的蛋白會污染膜）（如果是NC膜，則用鑷子捏住膜的一邊輕輕置于有超純水的平皿里，要使膜浮于水上，只有下層才與水接觸。這樣由于毛細管作用可使整個膜浸濕。若膜沉入水里，膜與水之間形成一層空氣膜，這樣會阻止膜吸水，靠毛細作用自然吸水后再*浸入水中10min以排除氣泡，隨后浸泡入轉(zhuǎn)移液中）

 

　　2、轉(zhuǎn)印結(jié)束，將膜從電轉(zhuǎn)槽中取出，TBST稍加漂洗3次，每次5-10min；爾后浸沒于封閉液中緩慢搖蕩1h。封閉是將轉(zhuǎn)印膜上坑坑洼洼的地方用BSA或脫脂奶粉填平，降低抗體的非特異性吸附產(chǎn)生很濃的背景。常用5%BSA和脫脂奶封閉，若是做磷酸化蛋白，只能用BSA，因為，奶中含有磷酸化蛋白。而封閉液濃度，可根據(jù)實驗需摸索條件。蛋白面朝上，封閉2h，搖床速度不超過40，結(jié)束后直接進一抗。